生理生化指标检测服务 

       
  生理生化检测服务提供人,小鼠,大鼠,兔,植物等多个物种的多种生理生化指标检测。详情联系。

         Elisa检测方法作为生理生化指标检测的主要方法,针对不同样本的处理方案如下:
      
         ELISA实验的样本准备
 
         在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,最好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1. 血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2. 血浆:
根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3. 尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5. 培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6. 组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7.土壤
直接用PBS提取就是跟组织匀浆一样,提取1g土壤,加9ml的匀浆液
比例为1:9
8.粪便
一般称取重量为1g左右(不少于50mg)然后按照10%的比例进行匀浆处理,离心提取上清液即可。10%的比例即为1g粪便样本加9ml的匀浆液,匀浆液选取的是生理盐水或者PBS缓冲液(pbs浓度为0.01mol,PH=7.4)
9.植物组织匀浆处理原则
    植物组织要保持新鲜,植物组织重量不少于50mg,匀浆比例按照10%,即1g组织加9ml匀浆液,匀浆液选取磷酸盐缓冲液,缓冲为PBS(ph7.2-7.4)浓度为0.01mol/L。