Western Blot

    免疫印迹immunoblotting又称蛋白质印迹western blot，它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。Western blot是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。Western blot常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。  
    华科鉴联基因科技为提供标准western blot技术服务（您只需提供样本），并对band进行灰度分析，得出蛋白表达相对定量结果。

服务要求

    需新鲜或正确保存的蛋白样品或者蛋白粗提液，阳性对照样品（如果有）， 检测目的蛋白的一抗（或由华科鉴联基因科技代购）。组织样品不少于50mg；细胞不少于5×106个；总蛋白浓度不低于 2μg/μl（至少50μl）。

服务基本流程

    1. 蛋白提取和定量（如果提供蛋白样品，则直接电泳预实验检测抗体特异性）；
    2. SDS-PAGE 10-15% 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳；
    3. 转膜（PVDF膜）；
    4. 封闭 （5%脱脂奶粉）；
    5. 一抗孵育（其中内参基因为Tubulin或HistoneH3.1）；
    6. 二抗孵育（如果由于材料降解或一抗造成实验无法继续，则收相关预实验费用）；
    7. 显色（ECL）；
    8. 曝光、洗片、灰度分析；

实验报告内容

    蛋白浓度，胶片，膜，以及灰度分析（如果需要）及实验报告